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紫外可見分光光度計的原理及問題解決方案

放大字體  縮小字體 發布日期:2016-12-13  來源:食品實驗室服務公眾號  瀏覽次數:11552
核心提示:紫外可見分光光度計是分析測試實驗室里常見的一種分析儀器,屬于光學儀器的一種,可廣泛應用于醫療衛生、化學化工、環保、地質、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學、農業、林業、漁業等領域中的科研、教學等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成及穩定常數的測定、反應動力學研究等。

一、紫外可見分光光度計的誕生
 
  世界首臺紫外可見分光光度計誕生于1918年的美國國家標準局。后來紫外可見分光光度計經不斷改進,又出現自動記錄、自動打印、數字顯示、微機控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,其應用范圍也在不斷擴大。紫外可見分光光度法從問世以來,在應用方面有了很大的發展,尤其是在相關學科發展的基礎上,促使分光光度計儀器的不斷創新,功能更加齊全,使得光度法的應用更拓寬了范圍。
 
二、紫外可見分光光度計的工作原理
 
1 紫外可見分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質,引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。
2 紫外可見光的范圍內,對于一個特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測量光譜可以進行定性分析,而且根據吸收與已知濃度的標樣的比較,還能進行定量分析。
 
三、首次使用紫外可見分光光度計人員須知
 
1 首次使用紫外可見分光光度計的人員,一般來說,一定要詳細閱讀儀器安全操作手冊,否則嚴禁操作儀器。準備操作儀器前,需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下,表面指針是否指向零刻度。如若不是,理應先調零然后才能連接電源。在使用的過程中,操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰,放大器使用過后,一定需要把檔位歸置到零。
2 除此之外,在操作紫外可見分光光度計時,操作人員需要留意一下機器的干燥劑,因為這是非常重要的。通常情況下,干燥劑有效時,儀器的工作是不會出現任何問題的?墒钱敻稍飫┦е,所出現的問題是非常嚴重的。除了儀器上面顯數不準之外,很容易使反射鏡變得污穢,從而使得光線率不準確。因此,日常使用儀器時,一定要注意干燥是否有效。當發現失效后,要及時進行更換。

 四、分光光度計使用注意事項
 
1 紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2 筆試PH計測定時,禁止將試劑或液體物質放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因將樣品槽弄臟,要盡可能及時清理干凈。
3 比色皿內溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔,池壁上液滴應用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
4 實驗結束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關電源將干燥劑放入樣品室內,蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認可方可離開。
 
五、紫外可見分光光度計出現問題處理方法
 
1 儀器電源接通后,光源不亮。
原因:
①光源燈泡已損壞。
②保險管燒壞。
處理方法:
①更換氘燈或鎢燈。
②更換保險管。
2 紫外可見分光光度計噪音較大。
原因:
光源燈泡使用時間超過壽命期。
處理方法:
更換光源燈泡。
3 自檢時提示波長自檢出錯。
原因:
自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
處理方法:
關上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
4 儀器自檢時提示通訊錯誤。
原因:
儀器與電腦之間的數據線沒有連接好。
處理方法:
連接好數據線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。
5 儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上。
原因:
在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良。
處理方法:
更換電位器。
6 在使用過程中,出現數字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
原因:
①光電倍增等老化,性能降低。
②信號處理板可能發生故障。
③前置放大版出現故障,引起反饋量增大
處理方法:
①開機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標準曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質。
②進一步檢查信號處理板,未發現信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關的電位器檢測,結果測得數據正常,這說明信號處理板沒有故障。
7 測試過程中提示能量太低。
原因:
①光源燈泡使用時間超過壽命期。
②樣池中有不透光的東西擋住了光。
處理方法:
①更換光源燈。
②拿走擋光的物品。
8 吸光值結果出現負值(最常見)。
原因:
沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
處理方法:
做空白記憶、調換參比液或用參比液配置樣品溶液。
9 當儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉換為按鍵開關式的簡易儀器。
原因:
開關觸點因長期氧化所致造成接觸不良。
處理方法:
用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。
10 樣品信號重現性不良
原因:
排除儀器本身的原因外,最大的可能是樣品溶液不均勻所致,在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復推拉不在同一個位置上。
處理方法:
①采取正確的試樣配置手段。
②修理推拉式樣品架的定位碰珠。
編輯:foodec007

 
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